訂購信息:
產(chǎn)品名稱:人類皰疹病毒6型核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96680
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
Ski細(xì)胞,上皮細(xì)胞癌 急性細(xì)胞白血病T細(xì)胞,CCRF-CEM細(xì)胞 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6乙酸二丙基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對色譜級]IPC-DPAA (ca. 0.5mol/L in Water)用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑
BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2乙酸二戊基銨(約0.5mol/L水溶液)[離子對色譜級]IPC-DAAA (ca. 0.5mol/L in Water)用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑
CPB1 Others Human CPB1 / PCPB 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙酸二己基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對色譜級]IPC-DHAA (ca. 0.5mol/L in Water)用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑
中國倉鼠肺細(xì)胞;V791-辛烷磺酸鈉[離子對色譜級]IPC-ALKS-8離子對色譜用試劑
CALU Others Human CALU / Calumenin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-壬烷磺酸鈉[離子對色譜級]IPC-ALKS-9離子對色譜用試劑
小鼠氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL>98%,BRProparacaine HCl
EJ膀胱癌細(xì)胞 Human bladder cancer cell line EJ 1640+10% FBSN-芐氧羰基-L->98.5%,BRZ-Ser-OH
IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白N-芐氧羰基-L-0.98Z-Thr-OH
NCI-H23(非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(單核細(xì)胞白血病)N-芐基>98.0%,BRN-Benzylglycine
CL-0383MDA-MB-436(癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2>98%,BR,一水物Zanamivir
人類皰疹病毒6型核酸檢測試劑盒SUP-B15Ph+急淋白血病細(xì)胞系 SUP-B15 acute lymphoblastic leukemia cell line Ph+ IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS二苯基砜-4,4'-二氯-3,3'-二磺酸二鈉(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)Di Diphenylsulfone-4,4'-dichloro-3,3'-disulfonate
成纖維細(xì)胞生長因子雙酚 C(>98.0%(GC))>98.0%(GC)2,2-Bis(4-hydroxy-3-methylphenyl)propane
293FT(胚腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 支氣管成纖維細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)4,4'-異亞丙基二苯氧基乙酸(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)4,4'-Isopropylidenediphenoxyacetic Acid
心臟成纖維細(xì)胞cDNAHCF cDNA四溴雙酚A(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)Tetrabromobisphenol A
IL1RL1 Others Human IL1RL1 / ST2 ( isoform A ) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-乙酰氨基-2-脫氧-D-半乳糖醛酸美國進口2-Acetamido-2-deoxy-D-galacturonic Acid
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。