訂購(gòu)信息：
 產(chǎn)品名稱(chēng)：流感病毒N亞型核酸分型檢測(cè)試劑盒
規(guī)格：50T
編號(hào)：BH-P96332
分類(lèi)：熒光PCR法
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶 Human鹽酸*（）Venlaine >98%,

TPST1 Others Human  TPST1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸*Venlaine >98%,BR

雜交瘤(B類(lèi));IB3C10H12A12G2H8F3原卟啉IXProtoporphyrin IX>95%

BST2 Others Human  TETHERIN / BST2 / CD317 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甲磺酸*（）Ropivacaine mesylateHPLC>98%,

原代上皮細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells　1ml甲磺酸*Ropivacaine mesylate>98%,BR
豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1*（）HPLC>98%,Flutamide

CA14 Others Human  CA14 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 環(huán)1酰胺>98%,一水合物USP,BRCyclophosphamide

CL-0443SK-N-MC(神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2環(huán)1酰胺（）HPLC>99%,Cyclophosphamide

NLGN1 Others Mouse 小鼠 Neuroligin 1 / NLGN1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) >98%,ARAmidopyrine/aminopyrine

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL血管緊張素II>98.0%,BRAngiotensin II
流感病毒N亞型核酸分型檢測(cè)試劑盒HCC827(非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-12,9-二丁基-1,10-鄰二氮雜菲(>96.0%(HPLC))>96.0%(HPLC)2,9-Dibutyl-1,10-phenanthroline

胰腺癌細(xì)胞;AsPC-12,9-二苯基-1,10-菲咯啉(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)2,9-Diphenyl-1,10-phenanthroline

ADAM15 Others Mouse 小鼠 ADAM15 / MDC15 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2,9-二氯-1,10-菲羅啉(>97.0%(GC)(T))>97.0%(GC)(T)2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline

MDA-MB-453 癌細(xì)胞3,4,7,8-四甲基-1,10-菲羅啉(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline

NCI-H1650非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H1650 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS5,5'-硫代雙水楊酸(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)5,5'-Thiodisalicylic Acid
檢測(cè)步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。