河南專業(yè)科研細胞實驗技術服務Tunel檢測實驗-效勝實業(yè)
效勝實業(yè)河南專業(yè)科研細胞實驗技術服務Tunel檢測實驗
本公司開展了HE染色,massson染色,PAS染色等染色,免疫組化,免疫熒光,WB .PCR.透射電鏡,掃描電鏡,細胞培養(yǎng)等實驗服務,*,周期短;流式檢測大致分為流式細胞術、細胞周期檢測、細胞增殖檢測、細胞因子檢測;TUNEL檢測的原理:
細胞在發(fā)生凋亡時,會激活一些DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測,可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP) ,從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測細胞凋亡的原理。
TUNEL檢測(石蠟切片)
取下適當?shù)男迈r的組織塊固定于4%-10%濃度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛與組織塊體積比在10:1和20:1之間,4攝氏度保存運輸;
TUNEL檢測(冰凍切片)
取下的新鮮組織應立即放入超低溫冰箱或者液氮中,用干冰運輸,固定好的切片應于-80或者-20度保存,并盡快用于檢測;
TUNEL檢測(細胞爬片)
細胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,換PBS緩沖液4度保存運輸,盡快用于檢測;