生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
中文名稱：BL21 (DE3) pLysS化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱：BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格：100μl×10管
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號(hào)：BJ-F0164556
產(chǎn)品介紹：
本品適合毒性蛋白和非毒性蛋白的表達(dá)。使用pUC19質(zhì)粒檢測，本品轉(zhuǎn)化效率可達(dá)10^7BL21 (DE3) pLysS化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是大腸桿菌BL21(DE3)pLysS經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。該菌株攜帶pLysS質(zhì)粒，具有氯抗性（Camr），PLysS含有表達(dá)T7的基因，能夠降低目的基因的背景表達(dá)水平，但不干擾目的蛋白的表達(dá)。 基因型：F- ompT hsdSB(rB - mB -) gal dcm(DE3)pLysS Camr。 儲(chǔ)存條件：-80℃ 組份： BL21 (DE3) pLysS化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 100μl×10 pUC19（0.1 ng/μl） 5μl 注意事項(xiàng) 1）感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用。 2）待轉(zhuǎn)化DNA加入體積不要過感受態(tài)細(xì)胞體積的1/10。 3）待轉(zhuǎn)化DNA加入感受態(tài)細(xì)胞后，請(qǐng)勿用移液槍吹打，輕輕彈勻即可。 4）為確保高效率轉(zhuǎn)化，整個(gè)操作過程應(yīng)盡量輕柔，并保持低溫。 5）本品應(yīng)于-80℃保存，請(qǐng)勿將感受態(tài)細(xì)胞儲(chǔ)存于-20℃或液氮中保存。 6）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運(yùn)送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時(shí)間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時(shí)不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
PH檢測試劑專題
腫瘤檢測試劑專題
蛋白制備試劑專題
細(xì)菌可溶性膜蛋白制備試劑盒
細(xì)胞可溶性總核蛋白制備試劑盒
DL-賴 DL-Lysine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR ratProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit大鼠前列E1(PGE1)elisa規(guī)格：96T/48T
DL-精鹽酸鹽 DL-Arginine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR HelicobacterpyloriRFLP基因分析試劑盒20
肉堿；BT； L(-)-Carnitine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-Ⅰelisa小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa規(guī)格：96T/48T
;肉堿（標(biāo)準(zhǔn)品） Levocarnitine;L(-)-Carnitine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC含量測定 小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)elisa ，英文名： ssDNA ELISA Kit
L-谷鈉，一水 L-Glutamic acid mono salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格：>99% 大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA檢測試劑盒Ratcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 96T/48T
L-(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人單皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgM)試劑盒 Human herpes simplexvirus Ⅰ+Ⅱ(HSVⅠ+Ⅱ)aibody(IgM)ELISA kit
（還原型） Glutathione (Reduced);GSH 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR RatProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit大鼠前列E2(PGE2)elisa規(guī)格：96T/48T
L-（標(biāo)準(zhǔn)品） Glutathione (Reduced) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品,還原型 Helly固著液50毫升
（氧化型） Glutathione(Oxidized) 質(zhì)量規(guī)格：度大于98%,BR MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-Ⅱelisa小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)elisa規(guī)格：96T/48T
DL-異亮 DL-Isoleucine 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)elisa ，英文名： AMA ELISA Kit
BL21 (DE3) pLysS化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 (二水） Formoterol fumarate 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,二水合物 大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA檢測試劑盒RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit 96T/48T
(無水) Formoterol fumarate 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,無水,EP 大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)試劑盒 Rat soluble Toll-like receptor 2,sTLR-2 ELISA Kit
法羅培南(鈉)(2.5水) Faropenem 質(zhì)量規(guī)格：度>99.0%,BR 大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA檢測試劑盒RatsolubleToll-likereceptor6,sTLR-6ELISAKit 96T/48T
Faropenem 質(zhì)量規(guī)格：標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定 大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)試劑盒 Rat soluble Toll-like receptor 6,sTLR-6 ELISA Kit
奧司他 Orlistat(synthesis) 質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%,BR 大鼠可溶性白介素-2 受體(sIL-2R)試劑盒 Rat soluble ierleukin-2 receptor,sIL-2R ELISA Kit
福鈉；福SV鈉 Rifamycin salt 質(zhì)量規(guī)格：>900IU/mg ,BR 大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA檢測試劑盒RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 96T/48T
Octreotide acetate 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)試劑盒 Rat soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit
S(+)-2-氨基-1-丁醇 (S)-(+)-2-Amino-1-butanol 質(zhì)量規(guī)格：>99%,液態(tài),0.944 g/mL ,25℃ 大鼠可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)試劑盒 Rat Soluble Lectin-like Oxidized Low Density Lipoprotein Receptor-1,sLOX-1 ELISA Kit
D-鞘氨醇 trans-D-erythro-sphingosine 質(zhì)量規(guī)格：度≥98% 大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA檢測試劑盒RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit 96T/48T
糖脂;植物鞘胺醇 ribophytosphingosine 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,進(jìn)口原裝 大鼠可溶性瘦素受體(sLR)試劑盒 Rat Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
