植物葉綠體純化試劑盒
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
植物葉綠體純化試劑盒 | 15次 | 890元 |
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葉綠體是重要的，負責植物光合作用的細胞器，很多重要的特性(如雄性不育)也跟葉綠體相關，所以葉綠體是研究植物生理和母系遺傳的重要材料。對植物葉綠體進行生化，遺傳和分子生物學研究都需要進行葉綠體純化。本產品就是基于密度梯度離心的，專門用于從植物葉片中純化完整葉綠體的試劑盒。它具有下列特點：
1. 即用型試劑盒，用戶不需要單獨配制各種溶液。
2. 提供A、B兩種選擇，A型用于葉綠體粗提，B型用于葉綠體精提，
3. 粗提葉綠體可用于后續(xù)的SDS-PAGE，Western，ELSIA和蛋白組分析。
4. 精提所得葉綠體完整，可用于后續(xù)的光合作用，電子鏈和磷酸化，跨膜轉運，
體外葉綠體蛋白合成，蛋白定位等研究。 還可用于葉綠體膜，基質，類
囊體，葉綠體DNA和葉綠體RNA純化。
5. 本產品足夠15次提取，每次可處理30g葉片，能得到5 mg左右葉綠體。
6. 已經成功用于菠菜，大豆，萵筍，白菜，煙草和甜菜等植物，還可用于更多植
物（可能需要優(yōu)化條件）。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節(jié)其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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