綠如藍(lán)蛋白染液
名稱(chēng) | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 手冊(cè) |
綠如藍(lán)蛋白染液 | 250次 | 詢(xún)價(jià) |
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本產(chǎn)品是一步式PAGE染色(CAT#:61204-10)的升級(jí)產(chǎn)品,是目前簡(jiǎn)單、靈敏的基于考馬斯亮藍(lán)的PAGE膠蛋白質(zhì)染色產(chǎn)品,*可以取代常用的Coomassie Brilliant Blue G-250 PAGE染色。它具有下列特點(diǎn):
1. 一步式操作。將漂洗后的PAGE膠放入染色液中后即可不管,無(wú)固定和脫色步驟,快10分鐘即可見(jiàn)條帶(對(duì)ng級(jí)別的樣品需要過(guò)夜)。
2. 高靈敏度。靈敏度跟銀染,SYPRO Ruby和Deep Purple等相當(dāng),達(dá)到納克水平。
3. 肉眼即可觀察結(jié)果,而SYPRO Ruby和Deep Purple等納克級(jí)染料需要貴重的檢測(cè)儀器。
4. 與質(zhì)譜等后續(xù)分析方法兼容。
5. 健康環(huán)保。不使用乙酸和甲醇等有刺激性和毒性的試劑。
6. 可以用于任何PAGE膠的蛋白檢測(cè),包括SDS-PAGE和2D膠。
7. 即開(kāi)即用,可以多次使用。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開(kāi)。水相層(無(wú)色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過(guò)離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表:pBlueScriptR TTC21B
pBMN
pBMN-IRES-GFP
pBMN-Z
pBNID-Id
pBNID
pBoBi
pBoBi-GFP
pBpSTR1
pBR322
pBridge
pBS185
pBS-T
pBS185 CMV-Cre
pBudCE4.1
pBudCE4.1-EGFP
pBV 220
pBV 222
pBV 221
pC-GoldyTALEN
pC-YFP
pCAAGS
pCAGG
pCAGGS
pCAMBIA1300
pCAMBIA1301
pCAMBIA1302
pCAMBIA1303
pCAMBIA1304