上海研盟生物有限公司*品質(zhì)供應(yīng)Anti-EPR1抗體,我公司銷售國(guó)內(nèi)外科研產(chǎn)品,如生物試劑、生化試劑,一抗二抗,各種標(biāo)記抗體,Elisa酶聯(lián)免疫試劑盒,放免試劑盒,培養(yǎng)基,各種動(dòng)物血清等產(chǎn)品,歡迎廣大新老客戶前來(lái)咨詢訂購(gòu),訂購(gòu):或。
效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體1抗體,Anti-EPR1抗體簡(jiǎn)單介紹:
【中文名稱】:效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體1抗體
【英文名稱】:Anti-EPR1抗體
【別 名】:Effector cell peptidase receptor 1; Effector cell protease receptor 1; EPR 1; EPR1; EPR-1; EPCR_HUMAN.
【規(guī) 格】:0.1ml/0.2ml
【相關(guān)標(biāo)記】:Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 647、AP、APC、Biotin、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、FITC、Gold、HRP、PE、PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5、PE-CY7、RBITC.
【濃 度】:1mg/1ml
【抗體來(lái)源】:Rabbit or Mouse or Goat
【克隆類型】:polyclonal or monoclonal
【產(chǎn)品類型】:一抗
【產(chǎn)品應(yīng)用】:可以用于做石蠟切片免疫組化,冰凍切片免疫組化,Elisa,WB,免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)。
效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體1抗體背景介紹:Cellular receptors for blood proteases regulate chemotaxis, extracellular proteolysis, and growth behavior of normal and malignant cells. Effector cell protease receptor-1 (EPR1) is a receptor for the coagulation protease factor Xa. EPR1 is characterized by a cysteine-rich extracellular module, a single membrane-spanning domain, and a serine-rich cytoplasmic tail featuring at least 15 potential phosphorylation sites. EPR1 also contains 2 N-linked glycosylation sites, 4 O-linked glycosylation sites, and a chondroitin sulfate attachment site, which may provide anchoring for carbohydrate chains, EPR1 transfectants bind to factor Xa in a specific and saturable manner, and in the absence of factor V/Va promote prothrombin activation in a factor Xa concentration-dependent reaction. Activated plaets and megakaryocytes express EPR1. Both EPR1 and membrane-bound factor Va are thought to be required to mediate factor Xa binding to the activated plaet to form a functional prothrombinase complex.
Western Blotting 實(shí)驗(yàn)步驟概述:
1、 組織取材:組織塊稱重
2、 利用液氮、研缽粉碎組織塊
3、 加入RIPA緩沖液(每克組織3ml RIPA),PMSF(每克組織30μl,10 mg/ml PMSF),
利用Polytron進(jìn)一步勻漿(15,000轉(zhuǎn)/分*1分鐘)維持4℃
4、 加入PMSF(每克組織30μl,10 mg/ml PMSF),冰上孵育30分鐘
5、 移入離心管4℃,約20,000g(約15,000轉(zhuǎn))15分鐘
6、 上清液為細(xì)胞裂解液可分裝-20℃保存
7、 進(jìn)行Bradford比色法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度
8、 取相同質(zhì)量的細(xì)胞裂解液(體積*蛋白質(zhì)濃度),并加等體積的2×電泳加樣緩沖液
9、 沸水浴中3分鐘
10、上樣
11、電泳(濃縮膠20mA,分離膠35mA)
12、電轉(zhuǎn)膜儀轉(zhuǎn)膜(100mA 40分鐘)
13、膜用麗春紅染色,膠用考馬斯亮藍(lán)染色
14、Westernblot 試劑盒顯色
15、分析比較記錄
效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體1抗體,Anti-EPR1抗體多肽的溶解與保存:
一、凍干多肽的溶解
1、多肽溶解的主要問(wèn)題是二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成。雖然疏水肽鏈二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成更明顯,但除zui短的肽鏈外,此現(xiàn)象產(chǎn)生在幾乎所有肽鏈,與極性無(wú)關(guān)。所以,溶解多肽的*個(gè)原則是使用無(wú)菌蒸餾水或去離子水,當(dāng)然無(wú)氧水。多肽溶液可能遇到細(xì)菌降解,為防止此情況的發(fā)生,應(yīng)溶解在無(wú)菌的蒸餾水中或用0.45或0.2孔徑的濾膜過(guò)濾除菌。含有Cys、Met、Trp的多肽很容易氧化,應(yīng)溶于無(wú)氧的水中,無(wú)氧水可通過(guò)注入惰性氣體(氮、氦、氬)減壓除氣得到;
2、若多肽不溶于純水,超聲處理有助于打碎顆粒并增加溶解度。注意:超聲處理會(huì)引起溶液發(fā)熱或多肽降解;
3、若多肽含有多個(gè)堿性氨基酸,使用(1-10%)的乙酸水溶液:對(duì)于疏水性強(qiáng)的多肽,應(yīng)使用50%的乙酸;
4、若多肽中含有大量酸性氨基酸,可用氨溶液(1-10%)或乙酸乙基*或重碳酸鹽等揮發(fā)性的堿性緩沖液溶解。pH值在層析前必須調(diào)整;
5、異丙醇和乙腈能溶解中等大小的多肽。若肽要上柱,有機(jī)溶劑的量必須很少否則將嚴(yán)重影響停留時(shí)間;
6、若多肽因含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳香鏈而高度疏水、或?yàn)橹行噪臅r(shí),DMF或DMSO等膜變性劑的使用,有利于多肽的溶解:
a.高濃度模變性劑通過(guò)破壞多肽的二級(jí)結(jié)構(gòu)而助溶;
b.膜變性劑適于多肽分析液的制備,但可能會(huì)對(duì)其生物活性的研究工作造成干擾;
c.DMF是變性劑(zui高濃度可達(dá)30%),滴加至多肽溶解;
d.反相層析法時(shí),DMF將與洗脫液前鋒一起流出,根據(jù)入量的多少,峰值可能很高。大多數(shù)肽能在大量DMF流出后幾分鐘內(nèi)流出,若肽鏈很小,洗脫太早,多肽的量將很低。
二、凍干多肽的保存
標(biāo)有“凍干保存”說(shuō)明的多肽應(yīng)該保存在冰凍條件下,以-20℃以下zuijia,其活性可保持多年。當(dāng)使用干凍產(chǎn)品時(shí),開蓋前其容器應(yīng)在裝有新鮮干燥箱內(nèi)升至室溫。-20℃的產(chǎn)品,此過(guò)程需要一小時(shí)或更長(zhǎng),隨保裝而定。否則,當(dāng)容器打開,水氣進(jìn)入導(dǎo)致凝縮而降低穩(wěn)定性。一旦打開,應(yīng)迅速稱量完畢,立即封閉以免潮解,親水肽更應(yīng)注意。
三、溶解多肽的保存
多肽溶液比干粉的穩(wěn)定性差很多,為了獲得較好的效果,遵循以下原則:
1、分成小包裝避免反復(fù)凍融。使用多少解凍多少;
2、溶于pH5-7無(wú)菌的緩沖液中,-20℃儲(chǔ)存;
3、由于細(xì)菌能降解多肽,儲(chǔ)存前應(yīng)過(guò)濾細(xì)菌;
4、包含Cys、Met、Try、Glu、Asp的多肽易于氧化,因此應(yīng)保存在無(wú)氧化劑的環(huán)境中。
相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:
HRG-alpha (Heregulin-alpha) 抗HRGα抗體
HSA(Human sermu albumin) 兔抗血清白蛋白抗體
HSA/human Serum albumin Monoclonal Antibody 鼠抗血清白蛋白單克隆抗體
NRG1/HRG-β(Heregulin-β) 抗HRGβ抗體
HSTF2/HSF2(Heat Shock Transcription Factor 2) 熱休克轉(zhuǎn)錄因子2抗體
HSL/LIPE(hormone-sensitive lipase) 荷爾蒙敏感脂肪酶抗體
Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS樣抑制因子3抗體
HSP-20(Heat Shock Protein beta 6) 熱休克蛋白-20抗體
HSP-27(Heat Shock Protein 27) 熱休克蛋白-27抗體
HSP-60( Heat shock protein-60) 熱休克蛋白-60抗體
HSP47( Heat shock protein-47) 熱休克蛋白-47抗體
HSP-70 (Heat shock protein-70) 熱休克蛋白-70抗體
HSP75/TRAP-1(Heat Shock Protein 75) 熱休克蛋白-75抗體
HSP-90α(Heat Shock Protein 90α ) 熱休克蛋白90α抗體
HSP-90α(Heat Shock Protein 90α ) 熱休克蛋白90α抗體
HSP-90β (heat sock protein-90β) 熱休克蛋白-90β 抗體
HSP-105 (heat sock protein-105) 熱休克蛋白HSP105抗體
HSPG1/Syndecan-2(heparin sulphate protoglycans 1) 多配體蛋白聚糖2/硫酸肝素糖蛋白1抗體
HtrA2/Omi(High temperature requirement protein A 2) *蛋白酶/線粒體*蛋白酶抗體
TRT(omerase catalytic subunit) 端粒酶抗體
human serum 血清抗體
Human serum 兔抗血清抗體