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體外粘連蛋白(VN)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)

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  • 公司名稱上海蔚霆生物科技有限公司
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  • 更新時(shí)間2016/9/3 19:55:44
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 上海蔚霆生物科技有限公司是一家是一家集銷售、技術(shù)服務(wù)于一體的高科技公司。專業(yè)經(jīng)營各類品牌Elisa試劑盒、血清、生物試劑、抗體、耗材等生物產(chǎn)品,公司堅(jiān)持以“高科技、高品質(zhì)、高服務(wù)”的經(jīng)營理念原則,在市場上樹立了公司的良好信譽(yù)和形象。您可以致電021--31665985(QQ:815983355),我們將利用專業(yè)知識(shí)來有效協(xié)助廣大科研人員在各自領(lǐng)域內(nèi)的科學(xué)研究工作。

ELISA試劑盒、細(xì)胞因子、抗體、血清、生物試劑
體外粘連蛋白(VN)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)
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體外粘連蛋白(VN)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè) 產(chǎn)品信息

貨號(hào):WT-E5696【體外粘連蛋白(VN)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)】ELISA試劑盒方法類型和操作步驟

  ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:① 固相的抗原或抗體,② 酶標(biāo)記的抗原或抗體,③ 酶作用的底物,根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的條件,可設(shè)計(jì)出各種不

  同類型的檢測(cè)方法。

【體外粘連蛋白(VN)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)】  ()雙抗體夾心法:

  雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原zui常用的方法,操作步驟如下:

  (1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。

  (2)加受檢標(biāo)本:使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時(shí)間,讓標(biāo)本中的抗原與同相載體上的抗體結(jié)合,形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。

  (3)加酶標(biāo)抗體:使同相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。

  (4)加底物:酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。

  根據(jù)同樣原理,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物,即可雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中的抗體。

【體外粘連蛋白(VN)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)】  ()雙位點(diǎn)一步法:

  在雙抗體夾心法測(cè)定抗原時(shí),如應(yīng)用針對(duì)抗原分子上兩個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體,則在測(cè)定時(shí)可使標(biāo)本的加入和酶標(biāo)抗體的加入兩步并作一步。這種雙位點(diǎn)一步法不但簡化了操作,

  縮短了反應(yīng)時(shí)間,如果使用高親和力的單克隆抗體,測(cè)定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應(yīng)用使測(cè)定抗原的ELISA提高到新水平。

  在一步法測(cè)定中,應(yīng)注意鉤狀效應(yīng)(hook effect),類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后滯現(xiàn)象。當(dāng)標(biāo)本中待測(cè)抗原濃度相當(dāng)高時(shí),過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成夾心復(fù)合物,所得結(jié)果將低于實(shí)際含量。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)甚至可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

【體外粘連蛋白(VN)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)】  ()間接法測(cè)抗體

  間接法是檢測(cè)抗體時(shí)zui常用的方法,其原理為利用酶標(biāo)記的抗-抗體檢測(cè)已與固相結(jié)合的受檢抗體。故稱為間接法。操作步驟如下:

  (1)將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。

  (2)加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合,在洗滌過程中被洗去。

  (3)加酶標(biāo)抗抗體:與固相復(fù)合物中的抗體結(jié)合,從而使該抗體間接地標(biāo)記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如: 欲測(cè)人對(duì)某種疾病的抗體,可用酶標(biāo)羊抗人lgG抗體。

  (4)加底物顯色:顏色深度代表標(biāo)本中受檢抗體的量。

本法只要更換不同的固相抗原,可以用一種酶標(biāo)抗抗體檢測(cè)各種與抗原相應(yīng)的抗體。

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