貨號:WT-E5595【人周期素依賴性激酶7(CDK7)ELISA試劑盒實驗步驟說明書】ELISA試劑盒基本操作注意事項
加樣:
在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。
保溫
抗原抗體完成反應的保溫過程稱為溫育(incubation)。
ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。為什么ELISA反應總是需要一定時間的溫育?
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。【人周期素依賴性激酶7(CDK7)ELISA試劑盒實驗步驟說明書】
保溫方式:ELISA儀器附有特制的電熱塊,水浴。
若用保溫箱:ELISA板放在濕盒內(nèi),在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上。反應板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。
室溫溫育的反應,操作時的室溫應嚴格限制在規(guī)定的范圍內(nèi),標準室溫溫度是指20-25℃,但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育。應注意溫育的溫度和時間應按規(guī)定力求準確。為保證這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板同時測定。
洗滌
洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟,但卻也決定著實驗的成敗。
ELSIA洗滌:達到分離游離的和結(jié)合的酶標記物的目的。【人周期素依賴性激酶7(CDK7)ELISA試劑盒實驗步驟說明書】
清除殘留在板孔中游離的物質(zhì),以及非特異性地吸附的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。
可以說在ELISA操作中,洗滌是zui主要的關鍵技術。
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