產(chǎn)品名稱:大鼠丙酮酸脫氫酶激酶同工酶1(PDK1)ELISA試劑盒
英文名稱:Rat Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 1 (PDK1) ELISA Kit
貨號(hào):ZK-R4565
規(guī)格: 96T/48T
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
大鼠丙酮酸脫氫酶激酶同工酶1(PDK1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
標(biāo)本的采集及保存
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)了夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
大鼠丙酮酸脫氫酶激酶同工酶1(PDK1)ELISA試劑盒DH5α工程菌 DH5α 1ml
BL21(DE3) 工程菌 BL21(DE3) 1ml
*0 工程菌 *0 1ml
JM109 工程菌 JM109 1ml
Rossita 工程菌 Rossita 1ml
超低分子量蛋白MARKER 3.3K-20.1K 15T
低分子量蛋白MARKER 14.4-97.4,電泳完須染色觀察 20T
次高分子量蛋白MARKER 43-200,電泳完須染色觀察 10T
預(yù)染低分子量蛋白MARKER 14.4-97.4,預(yù)染,電泳過(guò)程中可見(jiàn) 20T
預(yù)染次高分子量蛋白MARKER 43-200,預(yù)染,電泳過(guò)程中可見(jiàn) 10T
Western blotting蛋白MARKER 22-120,電泳后可與二抗結(jié)合顯色 20T
瓊脂粉 Agar,Powder 100g
兩性電解質(zhì)pH 3.0-10.0 Ampholyte pH 3.0-10.0 12ml
兩性電解質(zhì)pH 5.0-7.0 Ampholyte pH 5.0-7.0 12ml
兩性電解質(zhì)pH 6.0-9.0 Ampholyte pH 6.0-9.0 12ml
Tween-20 吐溫 20 100ml
細(xì)胞分離液 Percoll 100ml
30%丙烯酰胺(29:1) 30%丙烯酰胺(29:1) 500ml
2×蛋白上樣緩沖液(含DTT) 2×蛋白上樣緩沖液(含DTT) 10ml
10×TBS 10×TBS 500ml
10%過(guò)硫酸銨 10% APS 5ml
4×SDS-PAGE分離膠緩沖液(PH=8.8) 4×SDS-PAGE分離膠緩沖液(PH=8.8) 500ml
4×SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(PH=6.8) 4×SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(PH=6.8) 500ml
1×電泳轉(zhuǎn)移緩沖液 1×電泳轉(zhuǎn)移緩沖液 500ml
5×Tris-甘氨酸電泳緩沖液 5×Tris-甘氨酸電泳緩沖液 500ml
非變性蛋白裂解液 Nondenaturing Lysis Buffer 100ml
兩性電解質(zhì)pH4.0-6.0 Ampholyte pH4.0-6.0 12ml
10×DNA上樣緩沖液 10×DNA Loading Buffer 5ml
蛋白酶 K,10mg/ml Proteinase K,10mg/ml 1ml
D2000 plus DNA Ladder D2000 plus DNA Ladder 100T
RNAwait(非凍型組織RNA保存液) RNAwait(非凍型組織RNA保存液) 100ml