產(chǎn)品名稱:小鼠表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白A(SPA)ELISA檢測試劑盒
英文名稱:mouse Surfactant Associated Protein A (SPA) ELISA Kit
貨號(hào):ZK-M5211
規(guī)格: 96T/48T
品牌:子科生物ZIKER
有效期: 4 個(gè)月(4℃);8 個(gè)月(-20℃)。
保存方法: 2-8℃(頻繁使用時(shí)); -20℃(長時(shí)間不用時(shí))。
服務(wù):子科生物所有的elisa試劑盒均可免費(fèi)代測,全程Elisa實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo);
小鼠表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白A(SPA)ELISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
小鼠表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白A(SPA)ELISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
小鼠表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白A(SPA)ELISA檢測試劑盒11887S PhosphoPlus® β-Catenin (Ser675) Antibody Duet 1Kit Development Antibody Duet -20C
11888S TGF-β Receptor II (D3A1) Rabbit mAb 100µl TGF-beta/Smad Signaling Monoclonal Antibody -20C
11889S PI3 Kinase p55 (D2B3) Rabbit mAb 100µl PI3K / Akt Signaling Monoclonal Antibody -20C
11890S PINCH (5G7) Mouse mAb 100µl Adhesion Monoclonal Antibody -20C
11891S CHD8 (D3C1) Rabbit mAb 100µl Chromatin Regulation / Epigenetics Monoclonal Antibody -20C
11892S Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate) 100µl MAPK Signaling Monoclonal Antibody 4C
11893S DARPP-32 (19A3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) 100µl Neuroscience Monoclonal Antibody 4C
11896P UCHL1 (D8R2I) XP® Rabbit mAb 40µl Protein Stability Monoclonal Antibody -20C
11896S UCHL1 (D8R2I) XP® Rabbit mAb 100µl Protein Stability Monoclonal Antibody -20C
11899S Phospho-NDRG1 (Ser330) (D3A12) Rabbit mAb 100µl PI3K / Akt Signaling Monoclonal Antibody -20C
11900S PhosphoPlus® HSP27 (Ser82) Antibody Duet 1Kit Protein Folding Antibody Duet -20C
11901S WIP1 (D4F7) Rabbit mAb 100µl DNA Damage Monoclonal Antibody -20C
11903S PSMB5 Antibody 100µl Protein Stability Polyclonal Antibody -20C
11904P IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb 40µl NF-kB Signaling Monoclonal Antibody -20C
11904S IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb 100µl NF-kB Signaling Monoclonal Antibody -20C
11906S SignalSilence® MDR1/ABCB1 siRNA II 300µl Metabolism siRNA -20C
11907S PAI-1 (D9C4) Rabbit mAb 100µl Adhesion Monoclonal Antibody -20C