免疫印跡及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制劑)產(chǎn)品描述
本品WB/IP裂解液,是一種非變性條件下的裂解液,可以有效維持原有的蛋白間的相互作用。其主要裂解成分為1%的Triton X-100,不含蛋白酶、磷酸酶等抑制劑,裂解得到的蛋白樣品可用于Western、IP、CoIP以及許多兼容1%Triton X-100的酶活性或者生物小分子的檢測。
免疫印跡及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制劑運(yùn)輸與保存方法
冰袋(wet ice)運(yùn)輸。
-20℃保存,一年有效。盡量避免反復(fù)凍融,建議分裝后使用。
免疫印跡及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制劑注意事項(xiàng)
1)本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制劑,使用前請根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況添加合適酶抑制劑或不加酶抑制劑。
2)裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行。
3)如果WB/IP裂解液得到的蛋白樣品是用于酶活性測試或一些生物小分子的檢測,需要測試標(biāo)準(zhǔn)品用該裂解液稀釋后是否會顯著影響標(biāo)準(zhǔn)曲線,如無顯著影響,則可繼續(xù)使用。
4) 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白樣品,可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定其蛋白濃度(YEASEN CAT NO.20201ES76)。由于含有較高濃度的去垢劑,不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
5)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
免疫印跡及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制劑使用方法
(一) 細(xì)胞樣品
1)融解WB/IP裂解液(無抑制劑),混勻。取適當(dāng)量的裂解液,根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康臎Q定是否添加適當(dāng)酶抑制劑。
2)貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液清洗細(xì)胞一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后,細(xì)胞就會被裂解。
懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,需分裝成5×105~1×106個(gè)細(xì)胞/管,然后再裂解。因?yàn)榇髨F(tuán)細(xì)胞較難裂解充分,而少量的細(xì)胞由于裂解液容易和細(xì)胞充分接觸,相對比較容易裂解充分。
3)充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀、免疫共沉淀、酶或生物小分子檢測等操作。
裂解液用量說明:通常6孔板每孔細(xì)胞加入100μl裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到150μl或200μl。
(二)組織樣品:
1)把*切成細(xì)小的碎片。
2)融解WB/IP裂解液(無抑制劑),混勻。取適當(dāng)量的裂解液,根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康臎Q定是否添加適當(dāng)酶抑制劑。
3)按照每20mg組織加入100-200μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)
4)用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
kl-15061R C1orf2271號染色體開放閱讀框227抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-15158R C2orf712號染色體開放閱讀框71抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1453R Caveolin-1細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1470R CD82腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0967R Caspase-12半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1431R CK17細(xì)胞角蛋白17抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0979R CD38CD38抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0980R CD38CD38抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1592R CA I碳酸酐酶1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1709R CA II碳酸酐酶2抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1593R CK II Alpha絲/*蛋白質(zhì)激酶抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1594R CTNNA1α-連環(huán)蛋白抗體(鈣粘蛋白相關(guān)蛋白)Catenin α 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-4299R CNTROB乳腺癌易感基因2相互作用蛋白抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-4297R CLIP170細(xì)胞質(zhì)連接蛋白1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-4194R CD167b盤狀結(jié)構(gòu)域受體蛋白2抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-6030R CD200膜糖蛋白CD200抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-6034R CPA1胰羧肽酶A1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-6035R Carboxypeptidase A2羧肽酶A2抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-6033R Contactin 3腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-6036R Carboxypeptidase B1胰羧肽酶B1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-6038R CRABP2細(xì)胞維甲酸結(jié)合蛋白2抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-15161R C2orf802號染色體開放閱讀框80抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-6031R phospho-CD32B(Tyr291)磷酸化CD32B抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2934R Complement C3過敏毒素C3(補(bǔ)體C3)抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-6032R CD66c癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-6037R CPEB1細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-6039R CST7半*蛋白酶抑制劑7抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-15135R C22orf2922號染色體開放閱讀框29抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2667R Contactin-1神經(jīng)細(xì)胞表面蛋白F3 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2672R Cathepsin C/DPP1組織蛋白酶C抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0082R Caspase 4半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0087R caspase-3 p12 subunit活化半胱胺酸蛋白酶蛋白3抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-15276R C7ORF617號染色體開放閱讀框61抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2183R Claudin 11少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2211R CD80刺激分子B7-1蛋白抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2673R C5b-9末端補(bǔ)體復(fù)合物抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-15296R C8orf558號染色體開放閱讀框55抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-15186R C4a+C4b補(bǔ)體C4a+C4b蛋白抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2779R CD44v7CD44V7抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2780R CD44v10CD44V10抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2783R CD44v4CD44V4抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2790R Claudin 4緊密連接蛋白4抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-15221R C6orf1406號染色體開放閱讀框140抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2776R CACH2L型鈣通道蛋白抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2781R CACNA1G電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2788R Claudin 3緊密連接蛋白3抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-3172R phospho-c-Jun (Ser73)磷酸化原癌基因c-Jun抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-3173R phospho-c-Jun(Ser243)磷酸化原癌基因c-Jun抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-15079R C1orf861號染色體開放閱讀框86抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-15298R C8ORF598號染色體開放閱讀框59抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13816R phospho-C5R1 (Ser338)磷酸化補(bǔ)體成分5受體1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13817R Complement component C6補(bǔ)體C6抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13818R CEACAM7癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子7抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13819R Phospho-CEBP beta (Thr188)磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13820R Phospho-CEBP beta (Thr188 + Thr235)磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13821R CEBP Delta轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPδ抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13822R CEBPE轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPε抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13823R phospho-CEBPE (Thr74)磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPε抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13826R CEECAM1腦血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13804R C1QL4補(bǔ)體C1QL4鏈多肽抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13781R C19orf219號染色體開放閱讀框2抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13807R CCDC62卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白62抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13808R CCDC64卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-13811R CCDC72卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白72抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml